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合成多肽的切割流程
一，什么是“切割”？
切割是生产多肽中的一个步骤，从化学的角度来说，就是把多肽从树脂上分离并去掉多肽侧链和主链多余的临时保护基团。
(以下所有的切割都针对树脂的处理)
二，切割的前后流程。
1，准备待切割的树脂
这里只需要树脂里面的溶剂成分被洗涤掉并充分干燥树脂，理想状态是：像干燥的沙子一样，不容易占到其它物体的表面，例如瓶子或者纸。
2，切割液的选择和配置
这方面资料在网上也有很多，针对不同的多肽序列，选择不同的切割液种类。
这里主要列几种常见的切割液比例。
1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5：5：2.5：2.5：2.5
前两种适合没有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三种都可以使用。
（每1g树脂加8ml左右的切割液）
3，切割过程
常规的时间在2.5小时左右，要不停地震荡，温度为室温。
一些非常容易氧化或者变质的多肽，还需要排除容器里面的空气（用氮气代替），有时还需要适当降低环境的温度，例如0-10℃。
4，抽滤收集滤液
抽滤的方法很多，每个实验室都有自己的方法，小编主要说下，这是的滤液里面含有被切割下来的多肽和一部分侧链保护基团。一些不溶于TFA的保护基团，例如Pbf，是一种白色漂浮物，同树脂一起被过滤掉了。
5，沉淀、离心、洗涤
一般认为这个步骤是最影响收率的一步，处理不好的话，就会损失很多多肽。
1）溶剂：沉淀用的是冰乙醚，这里的冰字是要求乙醚的温度要很低，例如放置在-20摄氏度的冰箱里面。当然使用常温的乙醚，也是可以的。
乙醚和滤液的体积比为6：1比较合适。
2）仪器：能达到3000转每分钟的离心机
3）方法：在时间允许的情况下，小编建议把滤液往6倍体积的冰乙醚慢慢地滴加，可以用磁力搅拌器搅拌冰乙醚。目标是让刚加进去的滤液立刻析出多肽。
4）离心：把已经析出，变白的溶液离心即可。
5）洗涤：一般建议洗涤3次，每一次都要把溶液搅拌均匀。
6，抽干、的到粗品肽
离心3次之后的肽，各种侧链保护基团基本被乙醚洗涤了，这时只要将湿的多肽放到真空釜抽干即可。（别放恒温箱里面）
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